瑾萱生物(Gxene Biotech)多年来致力于建立完善的细胞培养平台,我们能够提供给客户多种细胞学基础实验。依托于优越的技术设备和完备的平台搭建,能够为客户提供的细胞凋亡检测服务。我们的科学家积累了丰富的细胞技术研究经验,凭借其娴熟精湛的技术水平,能够在很短的时间内快速将指定实验完成,同时能够确保每一个细胞实验步骤精细控制,尽可能保证客户得到理想的实验结果。此外,我们的实验室拥有先进的免疫荧光显微镜和流式细胞仪等系统,能为客户提供高质量的成像技术,为您的科研结果增色。根据客户的实际要求,瑾萱生物能够建立一套完整的实验方案,提供从细胞处理与制片,荧光显微镜观测和拍照等一站式实验服务,提升客户体验。
细胞凋亡(Apoptosis)是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。作为细胞的一种基本生物学现象,细胞凋亡是机体为更好地适应生存环境,而主动争取的一种死亡过程,是一个高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,一般过程包括4个阶段,即:诱导启动、细胞内调控、实施和凋亡细胞的吞噬搬运。瑾萱生物所提供的细胞凋亡检测服务,可用于检测不同类型、不同时期细胞凋亡状况及分析凋亡细胞比例。针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。
瑾萱生物提供的凋亡检测以“PI和Annexin-V双标”方法为主。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。我们将Annexin V 进行荧光素标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将采用Annexin V-PI双标技术,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。同时,依托自身的免疫荧光成像平台,瑾萱生物能为客户提供高质量的图片数据。
细胞凋亡检测服务 — Annexin V /PI双染色法:
项目
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细胞凋亡检测服务
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实验原理
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在细胞凋亡早期,位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidyl serine, PS)迁移至细胞膜外测。磷脂结合蛋白V(Annexin V)是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,它和PS具有高度的结合力。因此,Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外测的磷脂酰丝氨酸。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V,将Annexin V标记上荧光素(如异硫氰酸荧光素FITC),用流式细胞仪即可检测凋亡细胞。而PI染料能够与细胞内的DNA结合,区分坏死细胞和活细胞。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整, PI染料无法自由通过细胞膜进入细胞内与DNA结合,所以PI染料无法标记凋亡细胞和活细胞,而PI染料却能够通过坏死细胞的细胞膜与细胞内的DNA结合,坏死细胞内PI染料被488nm激光激发后会发射红荧光,被相应通道接收。所以Annexin V和PI同时使用,可以区分活细胞、早期凋亡细胞和坏死细胞。
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优点
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·检测早期细胞凋亡更为灵敏、实用性好
·Annexin V /PI双染色法操作更加省时,简单,结果更为可靠,是目前最为理想的检测细胞凋亡的方法
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应用
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细胞凋亡检测可应用于:
·肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究
·临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗
·对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价
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细胞凋亡检测服务主要实验流程:
我们的服务优势:
--保证细胞活力,制作高质量的细胞爬片;
--完善的实验操作水平和实验流程,实验人员具有多年实验成功经验,对细胞研究具有丰富的知识储备,能够保证检测结果客观准确;
--提供详细完整的实验报告,包含实验原始结果,每一项实验参数,可直接用于论文的撰写;
--完备的仪器平台:拥有多类型显微镜和流式细胞仪等重要仪器,具有高分辨率等特点,节约珍贵样本的同时即可获得详尽的数据;
--提供细胞培养、细胞染色和图片拍照等一站式技术服务
实验案例: