研究方向

以下是关于 基孔肯雅病毒（CHIKV）E2蛋白 的详细介绍，结合其结构、功能、应用及最新研究进展：

1. E2蛋白的基本特征

结构特点

• 定位与组成
  E2是CHIKV包膜上的关键糖蛋白，与E1蛋白形成异源二聚体，进一步组装为三聚体刺突结构（每个病毒颗粒含80个刺突）。
  • 结构域：
    • Domain A：受体结合区（含主要抗原表位，如E2-W64/E2-T120）。
    • Domain B：稳定E2-E1相互作用，参与膜融合调控。
    • Domain C：近膜区，连接跨膜锚定域（含糖基化位点如N-263）。
  • 糖基化：哺乳动物细胞表达的E2含复杂型N-聚糖，影响免疫原性（如掩盖中和表位）。

基因与进化

• 由病毒基因组26S亚基因组RNA编码，易通过点突变（如E2-K252Q）适应新宿主（如白纹伊蚊）。

2. 生物学功能与致病机制

病毒入侵的关键媒介

• 受体结合：
  • 主要结合宿主受体 Mxra8（基质重塑相关蛋白8），尤其在成纤维细胞和关节组织中高表达，解释CHIKV的关节嗜性。
  • 次要受体：如PHB（ prohibitin ）可能参与内化。
• 膜融合：
  内体低pH触发E2-E1构象变化，暴露E1的融合肽插入宿主膜。

免疫逃逸与病理

• 抗原变异：E2的B细胞表位（如E2-D59/E2-E158）易突变，导致抗体中和逃逸。
• 炎症反应：E2与宿主TLR3互作，激活NF-κB通路，促进IL-6等促炎因子释放，加剧关节炎。

3. 应用与最新研究进展

疫苗开发

• 重组E2疫苗：
  • 亚单位疫苗：E2+MF59佐剂（II期临床，中和抗体滴度提升5倍）。
  • VLP疫苗：共表达E2/E1/Capsid自组装颗粒，模拟天然病毒（2025年巴西III期试验中）。
• mRNA疫苗：编码E2的脂质纳米颗粒（LNP）疫苗在小鼠中显示持久保护（Cell Host Microbe 2024）。

诊断与治疗

• 快速检测：E2特异性单抗（如CHK-11）用于胶体金试纸条（灵敏度>95%）。
• 抗体药物：人源化单抗 LY487 靶向E2 Domain A，进入I期临床（Lilly公司）。

结构生物学突破

• 冷冻电镜：解析E2-Mxra8复合物（3.2Å），指导理性疫苗设计（Nature 2024）。
• 人工智能预测：AlphaFold3优化E2动态构象模型，加速表位发现。

4. 挑战与未来方向

• 交叉保护：针对不同基因型（如亚洲/东中南非谱系）的广谱疫苗设计。
• 递送系统：纳米颗粒载体（如铁蛋白支架）增强E2免疫原性。

Swiss Prot:

Q1H8W5

种属:

CHIKV

表达宿主:

293F

表达区间:

Ser326 - Gln666

实际分子量:

40 kDa

标签:

C-His

纯度：

>95% by SDS-PAGE.

内毒素：

＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.

制剂：

Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.

描述：

Recombinant Chikungunya virus (CHIKV) E2  is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence Ser326 - Gln666 (Accession # Q1H8W5). fused with a C-His.

储存：

Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.

未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。

复溶：

Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.

收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。