研究方向
1. 核心特性与作用机制
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酶学分类:丝氨酸蛋白酶(EC 3.4.21.9),专一性识别 DDDDK↓ 序列并在赖氨酸(K)C端切割。
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生物学功能:
-
激活胰蛋白酶原 → 启动消化酶级联反应
-
基因工程中切除融合蛋白标签(如His-tag、GST-tag)
2. 产品类型与选择指南
重组肠激酶对比
特性
牛源(常用)
人源(稀有)
重组酵母表达
比活性
≥40,000 U/mg
~30,000 U/mg
≥25,000 U/mg
标签类型
His-tag(可镍柱去除)
无标签
C端His/FLAG
适用pH范围
4.5-9.5
5.0-8.5
4.0-10.0
供应商推荐
Novoprotein, Sigma
R&D Systems
Thermo Fisher
3. 实验方案优化
融合蛋白酶切流程
-
反应体系(50 μL):
-
融合蛋白:0.1-1 mg/mL(溶于Tris-HCl pH 8.0)
-
肠激酶:0.1-0.2 U/μg蛋白(预实验确定)
-
关键添加剂:1 mM CaCl₂(增强稳定性)
-
条件:
-
25°C 16小时 或 4°C 48小时(低温减少非特异切割)
-
终止反应:
-
加1 mM PMSF 或 镍柱去除His-tagged酶
1. 核心特性与作用机制
- 酶学分类:丝氨酸蛋白酶(EC 3.4.21.9),专一性识别 DDDDK↓ 序列并在赖氨酸(K)C端切割。
-
生物学功能:
- 激活胰蛋白酶原 → 启动消化酶级联反应
- 基因工程中切除融合蛋白标签(如His-tag、GST-tag)
2. 产品类型与选择指南
重组肠激酶对比
| 特性 | 牛源(常用) | 人源(稀有) | 重组酵母表达 |
|---|---|---|---|
| 比活性 | ≥40,000 U/mg | ~30,000 U/mg | ≥25,000 U/mg |
| 标签类型 | His-tag(可镍柱去除) | 无标签 | C端His/FLAG |
| 适用pH范围 | 4.5-9.5 | 5.0-8.5 | 4.0-10.0 |
| 供应商推荐 | Novoprotein, Sigma | R&D Systems | Thermo Fisher |
3. 实验方案优化
融合蛋白酶切流程
-
反应体系(50 μL):
- 融合蛋白:0.1-1 mg/mL(溶于Tris-HCl pH 8.0)
- 肠激酶:0.1-0.2 U/μg蛋白(预实验确定)
- 关键添加剂:1 mM CaCl₂(增强稳定性)
-
条件:
- 25°C 16小时 或 4°C 48小时(低温减少非特异切割)
-
终止反应:
- 加1 mM PMSF 或 镍柱去除His-tagged酶
生物活性
Measured by its ability to cleave a colorimetric peptide substrate, ZLys-SBzl. The specific activity is >30,000 pmol/min/μg, as measured underthe described conditions.
Swiss Prot:
P98073
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Leu41-His1019
实际分子量:
98-
117 kDa (heavy
chain) & 46-49
kDa (light
chain) under
reducing
conditions
标签:
C-9*His
tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Enterokinase Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Leu41-His1019) of Human Human Enterokinase (Accession P98073) fused with a C-9*His
tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。

