活性重组蛋白 Recombinant Human Enterokinase/ ENTK Protein
活性重组蛋白 Recombinant Human Enterokinase/ ENTK Protein
种 属:Human
商品编号:GX00367
商品库存:100支 浏览:1631 次
会员价格:¥980.00元
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详细介绍:    

研究方向    

1. 核心特性与作用机制

  • 酶学分类:丝氨酸蛋白酶(EC 3.4.21.9),专一性识别 DDDDK↓ 序列并在赖氨酸(K)C端切割。
  • 生物学功能
    • 激活胰蛋白酶原 → 启动消化酶级联反应
    • 基因工程中切除融合蛋白标签(如His-tag、GST-tag)

2. 产品类型与选择指南

重组肠激酶对比

特性 牛源(常用) 人源(稀有) 重组酵母表达
比活性 ≥40,000 U/mg ~30,000 U/mg ≥25,000 U/mg
标签类型 His-tag(可镍柱去除) 无标签 C端His/FLAG
适用pH范围 4.5-9.5 5.0-8.5 4.0-10.0
供应商推荐 Novoprotein, Sigma R&D Systems Thermo Fisher

3. 实验方案优化

融合蛋白酶切流程

  1. 反应体系(50 μL):
    • 融合蛋白:0.1-1 mg/mL(溶于Tris-HCl pH 8.0)
    • 肠激酶:0.1-0.2 U/μg蛋白(预实验确定)
    • 关键添加剂:1 mM CaCl₂(增强稳定性)
  2. 条件
    • 25°C 16小时 或 4°C 48小时(低温减少非特异切割)
  3. 终止反应
    • 加1 mM PMSF 或 镍柱去除His-tagged酶



生物活性

Measured by its ability to cleave a colorimetric peptide substrate, ZLys-SBzl. The specific activity is >30,000 pmol/min/μg, as measured underthe described conditions.


Swiss Prot:
P98073


种属:
Human


表达宿主:
293F


表达区间:
Leu41-His1019


实际分子量:
98-
117 kDa (heavy
chain) & 46-49
kDa (light
chain) under
reducing
conditions


标签:
C-9*His
tag


纯度:
>95% by SDS-PAGE.


内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.


制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.


描述:
Recombinant Human Human Enterokinase Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Leu41-His1019) of Human Human Enterokinase (Accession P98073) fused with a C-9*His
tag.


储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。


复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。