研究方向    

1. 基本概述

• 定义：NAGLU（EC 3.2.1.50）是一种溶酶体水解酶，属于糖苷水解酶家族，负责降解糖胺聚糖（GAGs）中的硫酸乙酰肝素（HS）和硫酸角质素（KS）。
• 基因定位：NAGLU 基因位于17q21.2，含6个外显子，编码82 kDa前体蛋白，经剪切形成77 kDa活性形式。
• 表达分布：广泛存在于溶酶体中，肝、肾、脑组织高表达。

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2. 结构与功能特性

(1) 蛋白结构

• 催化域：含保守的GH89家族活性位点（Glu259和Asp354为关键催化残基）。
• 底物结合：特异性水解α-1,4-N-乙酰葡糖胺键，需先由IDUA酶预处理HS链。

(2) 生理功能

• GAG代谢：分解HS/KS的末端N-乙酰葡糖胺残基，维持细胞外基质稳态。
• 神经保护：参与神经元内HS降解，异常积累导致溶酶体贮积症。

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3. 疾病关联与突变谱

(1) 黏多糖贮积症IIIB型（MPS IIIB/Sanfilippo B）

• 致病机制：NAGLU 突变导致酶活性丧失，HS在溶酶体累积，引发神经退行性变。
• 临床特征：
  • 儿童期发病：智力衰退、行为异常、癫痫、肝脾肿大。
  • 无骨骼畸形（区别于其他MPS类型）。
• 突变热点：
  • R643C（欧美常见，酶活性完全丧失）
  • R297X（无义突变，截短蛋白）

(2) 其他关联疾病

• 周围神经病变：新发显性突变（如p.Leu678Val）与轴索性腓骨肌萎缩症2V型（CMT2V）相关。

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4. 诊断与治疗进展

(1) 诊断方法

• 酶活性检测：白细胞/成纤维细胞中NAGLU活性测定（金标准）。
• 基因检测：全外显子测序（WES）用于家系筛查。
• 新生儿筛查：部分国家纳入HS/KS代谢物检测（LC-MS/MS技术）。

(2) 治疗策略

• 酶替代疗法（ERT）：
  • 重组NAGLU（如BMN 250）：III期临床试验显示部分改善认知功能（2024年《JIMD》）。
  • 血脑屏障穿透技术：纳米载体递送（如AAV9-NAGLU）在动物模型中显著减少脑部HS沉积。
• 基因治疗：
  • LYS-SAF302（AAVrh10载体）：I/II期试验中，初步安全性良好。
• 底物减少疗法（SRT）：HS合成抑制剂（如Genistein）辅助缓解症状。

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5. 研究工具与资源

• 基因数据库：NAGLU（NCBI Gene ID: 4669），UniProt: P54802。
• 抗体与试剂：
  • 抗人NAGLU抗体（Abcam #ab169544）
  • 荧光底物：4-MU-β-GlcNAc（酶活性检测专用）。
• 动物模型：
  • Naglu-/- 小鼠（模拟MPS IIIB，用于治疗评估）。

生物活性

Measured by its ability to hydrolyze 4- Nitrophenyl-N- acetyl-alpha - D- glucosaminide. The specific activity is >900 pmol/min/μg, as measured under the decribed conditions.

Swiss Prot:
P54802


种属:
Human


表达宿主:
293F


表达区间:
Met1-Trp743


实际分子量:
70-95
kDa


标签:
C-His


纯度：
>95% by SDS-PAGE.


内毒素：
＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.


制剂：
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.


描述：
Recombinant Human Human NAGLU Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Met1-Trp743) of Human Human NAGLU (Accession P54802) fused with a C-His.


储存：
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。


复溶：
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。