研究方向
1. 基本概述
- 定义:IL-12B是IL-12与IL-23的共同亚基(p40),与IL-12A(p35)或IL-23A(p19)结合形成功能性异源二聚体,主导Th1免疫应答及炎症调控。
- 基因定位:Il12b 基因位于小鼠11号染色体(11q22),含8个外显子,与人类IL12B高度保守(85%氨基酸同源性)。
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表达特征:
- 主要来源:树突细胞(DCs)、巨噬细胞、中性粒细胞(TLR/IFN-γ激活后上调)。
- 病理高表达:自身免疫病(如EAE)、慢性感染病灶。
2. 结构与功能特性
(1) 蛋白结构
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单体形式:328氨基酸(40 kDa),含:
- N端信号肽(1-22 aa):引导分泌。
- Ig-like结构域(23-230 aa):与IL-12A/IL-23A结合的关键区域。
- 游离p40:可形成同源二聚体(p40₂),拮抗IL-12/IL-23信号。
- 翻译后修饰:糖基化(Asn100/222)影响蛋白稳定性与分泌效率。
(2) 功能机制
- IL-12信号:p40 + p35 → 激活IL-12Rβ1/β2→STAT4→IFN-γ分泌(抗肿瘤/感染)。
- IL-23信号:p40 + p19 → 激活IL-23R→STAT3→维持Th17反应(促炎)。
- 免疫调节:游离p40₂竞争性抑制IL-12/IL-23受体结合(天然拮抗剂)。
3. 疾病关联与研究应用
(1) 感染免疫模型
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Il12b-/- 小鼠:
- 抗胞内菌缺陷:对结核分枝杆菌、利什曼原虫易感性显著增加。
- 疫苗研究:作为佐剂载体(如p40-DNA疫苗增强Th1应答)。
(2) 自身免疫病
- 多发性硬化(EAE):靶向p40的单抗(如Ustekinumab)抑制Th1/Th17通路。
- 炎症性肠病(IBD):肠道菌群失调驱动p40过表达(益生菌干预研究)。
(3) 肿瘤免疫治疗
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双功能调控:
- 促瘤:p40₂促进MDSCs(髓系抑制细胞)募集。
- 抑瘤:重组IL-12(p40+p35)激活CD8+ T细胞。
4. 研究工具与资源
- 基因数据库:Il12b 基因 ID:16160(NCBI Gene)。
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抗体与试剂:
- 抗小鼠p40抗体(克隆C15.6,BioLegend #505202)。
- 重组p40蛋白(R&D Systems #2190-PB)。
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动物模型:
- Il12b-/- 小鼠(JAX #002694):Th1/Th17双重缺陷。
- 条件性敲除(如LysM-Cre×Il12bflox 研究髓系细胞特异性作用)。
生物活性
Measured by its ability to inhibit IL-23 induced IL-17 secretion by mouse splenocytes. The ED50 for this effect is 3- 18 ng/mL.
Swiss Prot:
P43432
种属:
Mouse
表达宿主:
293F
表达区间:
Met23-Ser335
实际分子量:
47-51
kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Mouse Mouse IL-12B Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Met23-Ser335) of Mouse Mouse IL-12B (Accession P43432) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。