研究方向
1. 基本概述
- 定义:小鼠血小板生成素(Thrombopoietin, TPO)是调控巨核细胞分化与血小板生成的核心细胞因子,结构与功能高度保守(与人类TPO同源性达72%)。
- 基因定位:Thpo 基因位于小鼠16号染色体(与人类THPO 同源),含6个外显子。
-
表达调控:
- 主要分泌器官:肝细胞(稳态下占80%)、骨髓基质细胞。
- 反馈机制:血小板通过Mpl受体介导TPO清除,维持动态平衡。
2. 结构与功能特性
(1) 蛋白结构
-
功能域:
- N端受体结合域(1-154 aa):含4个保守半胱氨酸(Cys7/28/39/85),形成二硫键稳定构象。
- C端糖基化域(155-332 aa):影响血清半衰期(小鼠TPO半衰期约3小时)。
- 翻译后修饰:N-糖基化(Asn110/114)调控分泌效率。
(2) 信号通路
-
经典通路:
- TPO-Mpl→激活JAK2/STAT5→促进巨核细胞增殖与血小板释放。
- 协同IL-3/G-CSF增强造血干细胞自我更新。
- 非经典作用:通过PI3K/AKT抑制巨核细胞凋亡。
3. 疾病模型与治疗研究
(1) 血液疾病模型
-
血小板减少症:
- Thpo-/- 小鼠:血小板计数降低50%,但巨核细胞数量正常(提示TPO主要调控血小板成熟)。
- 治疗应用:重组小鼠TPO(rmTPO)可加速辐射后血小板恢复(临床前研究)。
-
骨髓纤维化:
- 转基因TPO过表达小鼠(Alb-TPO)发展为骨髓纤维化(模拟原发性血小板增多症)。
(2) 肿瘤研究
- 化疗保护:TPO预处理减轻卡铂诱导的小鼠血小板减少(减少出血风险)。
- 免疫治疗增效:TPO增强CAR-T细胞在骨髓中的存活(2024年《Blood》研究)。
4. 研究工具与资源
- 基因数据库:Thpo 基因 ID:21826(NCBI Gene)。
-
抗体与试剂:
- 抗小鼠TPO抗体(克隆AF-488-NA,R&D Systems #AF-488-NA)。
- 重组小鼠TPO蛋白(PeproTech #315-14)。
-
动物模型:
- Thpo-/- 小鼠(JAX #003055):基础血小板研究。
- Mpl-/- 小鼠(TPO信号完全缺失,JAX #005051)。
生物活性
Measured in a cell proliferation assay using MO7e human megakaryocytic leukemic cells. The ED50 for this effect is 0.4-2.4 ng/mL.
Swiss Prot:
P40226-1
种属:
Mouse
表达宿主:
293F
表达区间:
Ser22-Thr356
实际分子量:
60-75
kDa
标签:
N-His
纯度:
>97% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Mouse Mouse Thrombopoietin Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ser22-Thr356) of Mouse Mouse Thrombopoietin (Accession P40226-1) fused with a N-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。