研究方向
CD40L(基因位于 小鼠X染色体)是TNF超家族(TNFSF)关键成员。作为CD40的配体,主要表达于活化的T细胞、血小板及部分先天免疫细胞,通过双向信号调控体液免疫、血栓形成及炎症反应,在疫苗应答、自身免疫病和动脉粥样硬化中具有核心作用。其短暂性表达和严格调控的特性使其成为免疫治疗的潜在靶点。
1. 分子特性与功能机制
(1)结构与动态调控
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三聚体构象:
- 膜结合型为32 kDa II型跨膜蛋白,可被金属蛋白酶(如ADAM10)切割生成可溶型(sCD40L);
- 结合CD40的KD≈10-8 M,触发受体簇集(信号持续时间<24小时)。
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多细胞作用:
- 免疫细胞:促进B细胞抗体类别转换(IgG↑5倍)、DC成熟(CD80/86表达↑3倍);
- 血小板:激活GPIIb/IIIa介导血栓形成(动脉栓塞风险↑2倍)。
(2)疾病模型关联
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免疫缺陷:
- Cd40lg-/- 小鼠生发中心缺失(疫苗接种抗体滴度↓90%);
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自身免疫病:
- SLE模型中sCD40L水平与肾小球肾炎严重度正相关(r=0.65);
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心血管疾病:
- 动脉粥样硬化斑块中CD40L-CD40轴促进巨噬细胞炎症因子分泌(IL-6↑4倍)。
2. 研究工具与干预策略
(1)基因工程模型
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条件性表达:
- Cd4-Cre;Cd40lgfl/fl 研究T细胞特异性功能;
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人源化小鼠:
- 携带人类CD40LG 突变(如X连锁高IgM综合征相关突变)的模型。
(2)治疗应用
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激动剂策略:
- 重组CD40L蛋白增强肿瘤疫苗效力(黑色素瘤模型T细胞浸润↑3倍);
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阻断疗法:
- 抗CD40L单抗(如MR1)减轻移植排斥反应(临床前研究)。
3. 检测与挑战
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流式检测:
- CD40L-PE/CD4-FITC双标分析活化T细胞;
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功能实验:
- B细胞-OT-II T细胞共育系统评估抗体产生。
挑战与展望
- 毒性控制:开发短半衰期CD40L变体(如PEG化修饰);
- 组织靶向:纳米载体递送siRNA抑制病变部位(如动脉斑块)CD40L过表达;
- 动态监测:基因编码荧光报告系统实时追踪CD40L表达。
生物活性
Measured in a cell proliferation assay using mouse splenic B cells in the presence of IL-4. The ED50 for this effect is 0.07- 0.35 ng/mL in the presence of a cross‑linking antibody, Mouse AntiHemagglutinin/HA Peptide Monoclonal Antibody.
Swiss Prot:
P27548
种属:
Mouse
表达宿主:
293F
表达区间:
Gly115-Leu260
实际分子量:
22-25
kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Mouse Mouse CD40
Ligand/TNFSF5 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gly115-Leu260) of Mouse Mouse CD40
Ligand/TNFSF5 (Accession P27548) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。