活性重组蛋白 Recombinant Mouse Wnt3a / MGC119419 / Wnt-3a Protein
活性重组蛋白 Recombinant Mouse Wnt3a / MGC119419 / Wnt-3a Protein
种 属:Mouse
商品编号:GX00260
商品库存:100支 浏览:1291 次
会员价格:¥980.00元
定购数量:      
详细介绍:    

研究方向    




Wnt3a(基因位于 小鼠11号染色体)是Wnt/β-catenin信号通路的核心配体。作为分泌型糖蛋白,通过调控胚胎发育、干细胞自我更新及组织再生,在神经发生、骨骼稳态和癌症进展中发挥关键作用。其表达异常可导致发育缺陷或肿瘤发生,是发育生物学与再生医学研究的重要靶点。


1. 分子特性与功能机制

(1)结构与分泌调控

  • 翻译后修饰
    • 棕榈酰化(由Porcn介导)对分泌和活性至关重要,缺失导致胞内滞留;
    • 糖基化修饰(如N-连接糖基化)影响受体结合亲和力(KD≈10-9 M)。
  • 信号级联
    • 结合Frizzled/LRP5/6受体复合物,抑制β-catenin磷酸化降解,促进核转位激活TCF/LEF转录因子;
    • 非经典通路(如Wnt/Ca2+)调控细胞极性(如原肠胚运动)。

(2)疾病模型关联

  • 发育缺陷
    • Wnt3a-/- 小鼠胚胎致死(原条形成失败);
  • 神经退行性疾病
    • 阿尔茨海默病模型中,Wnt3a过表达减少Aβ斑块(通过激活小胶质细胞吞噬);
  • 癌症进展
    • 结直肠癌类器官中Wnt3a驱动β-catenin核转位(靶基因Cyclin D1表达↑5倍)。

2. 研究工具与干预策略

(1)实验模型

  • 条件性敲除
    • Nestin-Cre;Wnt3afl/fl 研究神经干细胞维持;
  • 重组蛋白应用
    • 活性Wnt3a蛋白(LDN实验室)维持胚胎干细胞未分化状态(浓度≥100 ng/mL)。

(2)治疗潜力

  • 组织再生
    • 水凝胶缓释Wnt3a促进皮肤创伤修复(临床前模型愈合速度↑40%);
  • 靶向抑制
    • LGK974(Porcn抑制剂)阻断Wnt3a分泌治疗Wnt依赖性肿瘤。

3. 检测方法与挑战

  • 活性检测
    • TOPFlash荧光素酶报告基因定量β-catenin信号强度;
  • 成像技术
    • 全内反射荧光显微镜(TIRFM)观察Wnt3a囊泡分泌动态。

挑战与展望

  1. 递送精准性:开发组织特异性Wnt3a激活系统(如光控释放纳米颗粒);
  2. 剂量调控:解析低浓度(促再生)与高浓度(促癌)效应的分子阈值;
  3. 跨物种应用:人源化Wnt3a小鼠模型验证治疗安全性。






生物活性



Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The ED50 forthis effect is <500 ng/mL.





Swiss Prot:
P27467


种属:
Mouse


表达宿主:
293F


表达区间:
Ser19-Lys352


实际分子量:
65-70
kDa


标签:
C-hFc&His tag


纯度:
>95% by SDS-PAGE.


内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.


制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.


描述:
Recombinant Mouse Mouse Wnt3a Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ser19-Lys352) of Mouse Mouse Wnt3a (Accession P27467) fused with a C-hFc&His tag.


储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。


复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。