研究方向
AChE(基因位于 7q22.1)是丝氨酸水解酶家族关键成员。作为胆碱能神经递质分解的核心酶,通过催化乙酰胆碱(ACh)水解为胆碱和乙酸,终止突触信号传递,在神经肌肉功能、认知及毒理学中具有核心地位。其异常活性与神经退行性疾病、农药中毒直接相关。
1. 分子特性与功能机制
(1)结构与催化机制
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活性中心:
- 含催化三联体(Ser200-His440-Glu327),通过“电荷中继”系统实现高效水解(速率达105分子/秒);
- 外周阴离子位点(PAS)调控底物导向与抑制剂结合。
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多聚体形式:
- 突触间隙以胶原尾锚定(ColQ-AChE)四聚体为主,红细胞膜为GPI锚定二聚体。
(2)生理与病理作用
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神经肌肉调控:
- 确保运动终板快速终止ACh信号(避免持续去极化);
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疾病关联:
- 阿尔茨海默病:脑内AChE活性降低(但伴随毒性AChE-S亚型↑);
- 有机磷中毒:不可逆抑制AChE导致ACh蓄积(呼吸肌麻痹主因)。
2. 临床转化与干预
(1)治疗策略
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抑制剂开发:
- 可逆性抑制剂(如多奈哌齐)改善AD认知功能(延缓衰退30%);
- 肟类复能剂(如氯解磷定)破解有机磷-AChE磷酸化键。
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生物标志物:
- 红细胞AChE活性<30%提示有机磷暴露(灵敏度95%)。
(2)检测技术
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Ellman法:
- 使用DTNB显色定量酶活(检测限0.1 U/mL);
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分子成像:
- 11C-标记抑制剂PET扫描脑内AChE分布。
3. 挑战与展望
- 亚型选择性:开发靶向促淀粉样生成的AChE-S亚型抑制剂;
- 长效解毒剂:设计纳米胶囊缓释复能剂(如用于农药急救);
- 非神经功能:探索AChE在造血干细胞迁移中的作用。
生物活性
Measured by its ability to cleave Acetylthiocholine. The specific activity is >500 nmol/min/μg, as measured underthe described conditions.
Swiss Prot:
P22303
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Glu32-Leu614
实际分子量:
60-75 kDa
标签:
C-His
纯度:
>90% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human
Acetylcholinesterase Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Glu32-Leu614) of Human Human
Acetylcholinesterase (Accession P22303) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。