研究方向
GZMH(基因位于 14q11.2)是丝氨酸蛋白酶家族成员。主要由细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和NK细胞分泌,通过特异性切割靶蛋白触发肿瘤细胞凋亡和抗病毒防御,是免疫监视和癌症免疫治疗的研究热点。
1. 分子特性与功能机制
(1)酶学特性与底物谱
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切割特异性:
- 偏好缬氨酸/亮氨酸羧基端肽键(不同于Granzyme B的天冬氨酸特异性);
- 激活线粒体凋亡通路(如Bid剪切)和Caspase非依赖途径(核损伤)。
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抗病毒功能:
- 降解流感病毒核蛋白(NP),抑制病毒复制(感染模型中病毒载量↓70%)。
(2)疾病关联
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肿瘤免疫:
- 实体瘤浸润淋巴细胞(TILs)中GZMH高表达与患者生存期延长相关(HR=0.6);
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自身免疫病:
- 系统性红斑狼疮(SLE)患者血清GZMH水平升高(与抗dsDNA抗体正相关)。
2. 临床转化与检测技术
(1)治疗潜力
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过继性细胞治疗:
- GZMH基因修饰的CAR-T增强实体瘤穿透性(临床前模型);
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生物标志物:
- 血浆外泌体GZMH mRNA预测PD-1抑制剂响应(AUC=0.75)。
(2)实验方法
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活性检测:
- 荧光底物(如Ac-IEPD-AMC)区分GZMH与GZB活性;
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多色流式:
- 胞内染色(抗体克隆号:4C3)联合CD8/PD-1标记。
3. 挑战与展望
- 特异性调控:开发靶向肿瘤微环境的选择性GZMH激活剂;
- 联合策略:与溶瘤病毒协同增强免疫原性细胞死亡;
- 递送优化:纳米载体靶向递送至免疫豁免部位(如脑转移灶)。
生物活性
Measured by its ability to cleave a peptide substrate, Succinyl-Phe-Leu-Phe-ThioBenzyl ester(Suc-FLFSBzl), in the presence of 5,5’- Dithio-bis (2- nitrobenzoic acid) (DTNB). The specific activity is >5,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P20718
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Glu19-Leu246
实际分子量:
38-
40 kDa
标签:
C-
10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Granzyme H Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Glu19-Leu246) of Human Human Granzyme H (Accession P20718) fused with a C-
10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。