研究方向
VEGFA(基因位于 大鼠17号染色体)是血管内皮生长因子家族的核心成员。其通过激活VEGFR1/2信号通路,调控血管生成、血管通透性及组织修复,在缺血性疾病、肿瘤生长和慢性炎症中发挥关键作用。大鼠VEGFA与人源蛋白具有高度保守性(氨基酸序列同源性92%),是心血管和神经研究的常用模型分子。
1. 分子特性与功能机制
(1)亚型与结构
-
可变剪切亚型:
- 大鼠VEGFA存在VEGF164(主要活性形式)、VEGF120(可溶性)和VEGF188(基质结合型),差异在于肝素结合域的有无;
- VEGF164(对应人VEGF165)兼具促血管生成和通透性调控功能(EC50≈0.5 nM)。
-
受体结合:
- 通过VEGFR2(KDR/Flk-1)激活PI3K-AKT和ERK通路,促进内皮细胞迁移/存活。
(2)病理生理作用
-
缺血修复:
- 心肌梗死模型中,VEGFA过表达促进侧支循环形成(毛细血管密度↑40%);
-
肿瘤微环境:
- 胶质瘤细胞分泌VEGFA诱导血管异常增生(抗VEGF抗体减少肿瘤体积50%)。
2. 研究工具与实验方案
(1)重组蛋白应用
-
产品参数:
- 重组大鼠VEGFA164(Cat# 564-RV,R&D Systems),活性≥1×106 units/mg;
- 使用建议:体外实验(10-100 ng/mL),体内局部注射(1-5 μg/部位)。
-
干预模型:
- 腺病毒载体(如Ad-VEGFA)用于肢体缺血研究;
- siRNA沉默(靶向外显子3)抑制病理性血管增生。
3. 检测方法与技术
-
表达分析:
- qPCR 引物设计(推荐靶向外显子5-7交界区);
-
功能验证:
- Matrigel管形成实验 定量内皮细胞成管能力;
- Evans Blue染色 评估血管通透性变化。
4. 挑战与展望
- 递送精准性:开发靶向缺血组织的VEGFA缓释水凝胶;
- 副作用管理:平衡促血管生成与水肿风险(如联合Angiopoietin-1);
- 跨物种转化:优化人源化大鼠模型(如hVEGF转基因大鼠)。
生物活性
Measured in a cell proliferation assay using HUVEC human umbilical vein endothelial cells. The ED50 forthis effect is 0.75‑3.75 ng/mL
Swiss Prot:
P16612-2
种属:
Rat
表达宿主:
293F
表达区间:
Ala27-
Arg190(isoform2)
实际分子量:
25 kDa
标签:
No tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Rat Rat VEGFA Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ala27-
Arg190(isoform2)) of Rat Rat VEGFA (Accession P16612-2) fused with a No tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。