研究方向
CCL2(又称 JE/MCP-1,基因位于 大鼠11号染色体)是CC类趋化因子家族的核心成员,通过结合受体CCR2调控单核/巨噬细胞趋化、炎症反应及组织修复。在神经炎症、动脉粥样硬化和肿瘤微环境重塑中发挥关键作用。其表达受NF-κB、AP-1等转录因子调控,且与多种大鼠疾病模型密切相关。
1. 生物学功能与信号机制
(1)免疫细胞招募与激活
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单核/巨噬细胞趋化:
- 通过CCR2-PI3K/RhoA通路引导单核细胞浸润炎症或损伤部位(如心肌梗死模型中的缺血区)。
- 促进M1型巨噬细胞极化(IL-6/TNF-α分泌增加),加剧神经炎症(如阿尔茨海默病模型)。
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T细胞调控:
- 间接通过巨噬细胞递呈抗原影响Th1/Th17应答(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)。
(2)非免疫学功能
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组织纤维化:
- 激活肝星状细胞(HSCs)促进胶原沉积(四氯化碳诱导的肝纤维化模型)。
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疼痛调控:
- 背根神经节中CCL2-CCR2轴通过TRPV1通道增强痛觉敏感(慢性神经病理性疼痛模型)。
2. 研究意义与疾病模型
(1)大鼠疾病模型关联
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心血管疾病:
- 动脉粥样硬化模型(高脂饮食诱导)中,主动脉CCL2 mRNA水平升高5倍。
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神经系统疾病:
- 脑缺血再灌注损伤后6小时,脑脊液CCL2浓度峰值达1200 pg/mL。
(2)干预策略
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基因沉默:
- 慢病毒递送CCL2 shRNA使肝纤维化大鼠胶原面积减少60%(Hepatology, 2024)。
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药物抑制:
- CCR2拮抗剂(RS504393)改善糖尿病肾病模型肾小球硬化。
3. 检测方法与技术
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基因水平:
- qRT-PCR 检测 Ccl2 mRNA(引物序列:F-5'-GCTGTAGTTTTTGTCACCAAG-3', R-5'-AGAGTGAGTGTTGAGGTGG-3')。
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蛋白分析:
- ELISA(灵敏度1 pg/mL)定量血清/组织匀浆CCL2(正常大鼠血清浓度:<50 pg/mL)。
4. 总结与挑战
CCL2作为多效性趋化因子,在大鼠模型中需关注:
- 细胞特异性:开发靶向巨噬细胞或神经元的条件性敲除模型;
- 动态监测:微型化传感器实时检测活体CCL2波动;
- 转化瓶颈:优化CCR2抑制剂的跨物种应用(如避免肝毒性)。
生物活性
Measured by its ability to chemoattract BaF3 mouse pro‑B cells transfected with human CCR2A. The ED50 forthis effect is 30-150 ng/mL.
Swiss Prot:
P14844
种属:
Rat
表达宿主:
293F
表达区间:
Gln24-Asn148
实际分子量:
25- 35 kDa
标签:
C-His
纯度:
>90% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Rat Rat CCL2/JE/MCP-1 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gln24-Asn148) of Rat Rat CCL2/JE/MCP-1 (Accession P14844) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。