研究方向
Granzyme A（GZMA） 是由 GZMA 基因编码的 丝氨酸蛋白酶，主要储存于细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）和自然杀伤（NK）细胞的颗粒中。其核心特征包括：
- 结构特征：含催化三联体（His57-Asp102-Ser195），通过二硫键形成同源二聚体（60 kDa）；
-
功能核心：
- 靶细胞杀伤：通过穿孔素（Perforin）依赖途径诱导凋亡；
- 炎症调控：剪切SET复合物触发线粒体DNA释放，激活cGAS-STING通路；
- 疾病关联：与病毒感染、自身免疫病（如类风湿关节炎）及肿瘤免疫治疗相关。
1. 生物学功能
（1）细胞毒性作用
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凋亡诱导：
- 剪切核蛋白（如SET、HMGB1）导致DNA损伤；
- 激活Caspase非依赖的细胞死亡途径（与Granzyme B互补）。
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抗病毒防御：
- 直接降解病毒蛋白（如HIV-1衣壳蛋白）；
- 通过cGAS-STING通路增强Ⅰ型干扰素应答。
（2）炎症与免疫调节
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促炎效应：
- 释放HMGB1促进巨噬细胞活化（脓毒症模型）；
- 剪切IL-1β前体增强其活性。
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自身免疫损伤：
- 滑膜液中GZMA水平与类风湿关节炎活动度正相关；
- 通过剪切血管基底膜加剧血管炎。
（3）肿瘤免疫监视
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免疫治疗响应：
- 肿瘤浸润CTLs中GZMA高表达者PD-1抑制剂疗效更佳；
- 联合放疗可增强肿瘤细胞免疫原性死亡。
2. 研究意义
（1）理论突破
- 揭示 “GZMA-SET-线粒体DNA”轴 在炎症中的非经典作用；
- 解析 GZMA与细胞焦亡（Pyroptosis） 的交叉调控机制。
（2）转化潜力
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肿瘤治疗：
- 工程化CAR-T细胞过表达GZMA增强实体瘤杀伤；
- GZMA激活型前药（如GZMA-PD-1融合蛋白）开发中。
3. 检测方法
（1）蛋白水平
- ELISA：检测血清/组织液GZMA（正常<5 ng/mL，免疫激活时>50 ng/mL）；
- 流式细胞术：胞内染色评估CTLs/NK细胞的GZMA储存量。
（2）活性分析
- 荧光底物：Ac-IEPD-AMC检测酶活性（Ex380/Em460 nm）；
- 功能实验：共培养CTLs与靶细胞（CFSE/7-AAD双标法）。
4. 临床应用
（1）诊断潜力
- 感染监测：GZMA水平预警病毒再激活（如CMV感染）；
- 自身免疫病：滑膜液GZMA/Perforin比值鉴别类风湿关节炎亚型。
（2）治疗进展
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免疫治疗：
- GZMA基因修饰：增强TILs（肿瘤浸润淋巴细胞）活性；
- 抑制剂：如α2-巨球蛋白控制过度炎症（脓毒症试验）。
- 联合策略：GZMA激活联合免疫检查点阻断（临床前显著协同）。
5. 总结与展望
（1）挑战
- 双重角色：抗肿瘤有益但促炎有害（需组织特异性调控）；
- 递送效率：GZMA半衰期短（<2小时），需长效制剂。
（2）未来方向
- 纳米载体：pH敏感型GZMA缓释系统靶向肿瘤；
- 多组学整合：结合GZMA剪切组与免疫微环境预测疗效。
生物活性
Measured by its ability to cleave a colorimetric peptide substrate, N- carbobenzyloxy-Gly-ArgThioBenzyl ester (Z-GR-SBzl), in the presence of 5,5’Dithio-bis (2- nitrobenzoic acid) (DTNB). The specific activity is >5,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.
Swiss Prot:
P12544
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Cys26-Val262
实际分子量:
29- 33 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度：
>95% by SDS-PAGE.
内毒素：
＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂：
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述：
Recombinant Human Human Granzyme A Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Cys26-Val262) of Human Human Granzyme A (Accession P12544) fused with a C- 10*His tag.
储存：
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。
复溶：
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。