研究方向    

Protective Protein/Cathepsin A（PPCA） 是由 CTSA 基因编码的 多功能溶酶体酶，同时具备丝氨酸羧肽酶和去唾液酸糖蛋白受体活性。其核心特征包括：

• 结构特征：形成六聚体复合物，含催化三联体（Ser150-His353-Asp324）和碳水化合物识别域；
• 功能核心：
  • 酶活性调控：激活β-半乳糖苷酶（GLB1）和神经氨酸酶（NEU1），维持溶酶体酶网络稳定；
  • 细胞保护：通过去唾液酸糖蛋白受体介导内吞途径清除衰老蛋白；
  • 疾病关联：缺陷导致半乳糖唾液酸贮积症（GS），表现为神经退化与骨骼异常。

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1. 生物学功能

（1）溶酶体酶网络维持

• 酶复合物组装：与GLB1/NEU1形成多酶复合物，防止降解（GS患者中复合物解体）；
• 底物特异性：水解神经节苷脂GM1和糖蛋白（如层粘连蛋白）。

（2）细胞清除与信号调控

• 衰老蛋白清除：介导去唾液酸化糖蛋白的溶酶体降解；
• 炎症抑制：通过NEU1调控TLR4信号通路（抑制NF-κB过度激活）。

（3）神经保护

• 髓鞘维持：PPCA缺失导致少突胶质细胞功能障碍（动物模型显示髓鞘脱失）；
• 突触可塑性：调节神经节苷脂代谢影响神经元通讯。

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2. 研究意义

（1）理论突破

• 揭示 “PPCA-溶酶体酶级联” 在糖脂代谢中的核心作用；
• 解析 PPCA结构动态性 对多酶复合物组装的影响。

（2）转化潜力

• 基因治疗：AAV-CTSA递送挽救GS模型表型（临床前成功）；
• 酶替代疗法：重组PPCA-β-半乳糖苷酶融合蛋白开发中。

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3. 检测方法

（1）酶活性检测

• 荧光底物法：4-MU-β-D-半乳糖苷检测GLB1/PPCA复合物活性（GS患者活性<10%）；
• 质谱分析：定量尿液中累积的寡糖（如唾液酸化寡糖）。

（2）基因与影像学

• 全外显子测序：检出 CTSA 突变（如p.Tyr221Cys常见于日本人群）；
• 脑MRI：特征性表现为小脑萎缩和白质病变。

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4. 临床应用

（1）诊断与分型

• 新生儿筛查：干血斑PPCA活性检测（联合GLB1/NEU1）；
• 产前诊断：羊水细胞酶活性分析或基因检测。

（2）治疗进展

• 对症治疗：
  • 抗癫痫药物控制神经症状；
  • 骨科手术矫正骨骼畸形。
• 前沿疗法：
  • 造血干细胞移植（HSCT）：部分改善神经症状（限于早期病例）；
  • AAV9-CTSA：鞘内注射临床试验筹备中（2026年启动）。

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5. 总结与展望

（1）挑战

• 血脑屏障穿透：全身性治疗难以纠正中枢神经病变；
• 表型异质性：同一突变在不同个体的严重度差异显著。

（2）未来方向

• 靶向递送：纳米载体包载PPCA穿透血脑屏障；
• 多组学整合：结合酶活性谱与代谢组学预测疾病进展。

生物活性

Measured by its ability to cleave the fluorogenic peptide substrate, McaRPPGFSAFK(Dnp)- OH. The specific activity is >75 pmol/min/µg, as measured under the described conditions

Swiss Prot:

P10619

种属:

Human

表达宿主:

293F

表达区间:

Ala29-Tyr480

实际分子量:

51- 62 kDa

标签:

C- 10*His tag

纯度：

>95% by SDS-PAGE.

内毒素：

＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.

制剂：

Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.

描述：

Recombinant Human Human Protective Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ala29-Tyr480) of Human Human Protective (Accession P10619) fused with a C- 10*His tag.

储存：

Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.

未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。

复溶：

Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.

收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。