研究方向
骨桥蛋白(Osteopontin, OPN) 是由 SPP1 基因编码的 多功能磷酸化糖蛋白,属于SIBLING(小整合素结合配体N-连接糖蛋白)家族,广泛表达于骨、免疫细胞及上皮组织中。其核心特征包括:
- 结构特征:含RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)整合素结合序列、SVVYGLR凝血酶剪切位点及多个磷酸化/糖基化修饰位点;
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功能核心:
- 细胞黏附与迁移:通过整合素(如αvβ3)和CD44受体调控;
- 免疫调节:促进Th1/Th17极化,参与慢性炎症;
- 疾病关联:与骨质疏松、肿瘤转移、心血管疾病及自身免疫病(如多发性硬化)密切相关。
1. 生物学功能
(1)骨代谢与矿化
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骨重塑调控:
- 抑制羟基磷灰石结晶生长(防止病理性钙化);
- 通过RGD-整合素激活破骨细胞(OC)骨吸收功能。
- 骨折修复:OPN缺失导致愈伤组织形成延迟(小鼠模型)。
(2)免疫炎症网络
- 巨噬细胞极化:诱导iNOS+ M1型促炎表型(如动脉粥样硬化斑块);
- 自身免疫触发:脑脊液OPN水平与多发性硬化(MS)复发正相关。
(3)肿瘤微环境
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转移促进:
- 剪切形式(如OPN-N)通过CD44激活PI3K-AKT通路;
- 诱导EMT(上皮-间质转化)和血管生成(VEGF上调)。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “OPN剪切变体-受体选择性” 在疾病中的功能异质性;
- 解析 翻译后修饰(如磷酸化)对OPN-整合素互作的调控。
(2)转化潜力
- 骨病治疗:OPN模拟肽(如OPN-RGD)促进骨再生;
- 抗癌策略:抗OPN抗体(如ASKP1240)阻断转移灶形成。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测血清OPN(正常<50 ng/mL,MS活动期>200 ng/mL);
- Western Blot:区分全长(~60 kDa)与剪切形式(~30 kDa)。
(2)功能分析
- 迁移实验:Transwell评估OPN对肿瘤细胞的趋化作用;
- 基因编辑模型:Spp1 敲除鼠研究骨/免疫表型。
4. 临床应用
(1)诊断潜力
- 肿瘤预后:OPN高表达与肝癌/乳腺癌生存率负相关;
- 心血管风险:血浆OPN>75 ng/mL预测冠脉钙化进展。
(2)治疗进展
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靶向干预:
- OPN抑制剂(如小分子化合物CLI-095)治疗MS(II期试验);
- OPN涂层材料:骨科植入物表面促进骨整合。
- 生物标志物:联合OPN/MMP-9指导抗转移治疗。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 功能复杂性:需区分不同剪切体(如OPN-FL vs. OPN-N)的病理贡献;
- 治疗特异性:全身性OPN抑制可能干扰生理性骨修复。
(2)未来方向
- 纳米递送:靶向肿瘤的OPN-siRNA缓释系统;
- 多组学整合:结合OPN修饰谱与免疫微环境预测治疗响应。
生物活性
Measured by the ability of the immobilized protein to support the adhesion of HEK293 human embryonic kidney cells.Recombinant Human Osteopontin/OPN coated plate, cell adhesion is enhanced in a dose-dependent manner after 1 hour incubation at 37 °C. The ED50 for this effect is 0.2-0.8 µg/mL.
Swiss Prot:
P10451-1
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Ile17-Asn 314
实际分子量:
55kDa
标签:
C-His
纯度:
>90% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Osteopontin Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ile17-Asn 314) of Human Human Osteopontin (Accession P10451-1) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。