研究方向
Cystatin SA(CST2) 是由 CST2 基因编码的 II型半胱氨酸蛋白酶抑制剂,属于Cystatin超家族成员,主要表达于唾液腺、泪腺等外分泌组织。其核心特征包括:
- 结构特征:含保守的N端甘氨酸残基和QVVAG结构域,通过竞争性结合半胱氨酸蛋白酶(如Cathepsin B/L)的活性中心发挥抑制作用;
-
功能核心:
- 蛋白酶调控:保护组织免受过度蛋白水解损伤(如牙釉质保护);
- 免疫调节:通过抑制病原体蛋白酶参与黏膜防御;
- 疾病关联:与口腔疾病(如龋齿)、肿瘤转移及自身免疫病(如干燥综合征)相关。
1. 生物学功能
(1)组织保护与稳态
- 唾液防御:抑制细菌蛋白酶(如牙龈卟啉单胞菌的Gingipains),维护口腔黏膜完整性;
- 泪液功能:与溶菌酶协同保护角膜上皮(干燥综合征患者水平降低)。
(2)肿瘤微环境调控
- 转移抑制:通过阻断Cathepsin B介导的ECM降解(乳腺癌模型);
- 免疫逃逸:肿瘤细胞高表达CST2可抵抗T细胞颗粒酶B的杀伤。
(3)炎症平衡
- 蛋白酶-抗蛋白酶失衡:CST2缺陷导致慢性炎症(如牙周炎);
- 自身抗原潜在角色:干燥综合征患者唾液CST2抗体水平升高。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “CST2-病原体蛋白酶”互作 在黏膜免疫中的新型防御机制;
- 解析 糖基化修饰(如唾液酸化)对CST2功能的影响。
(2)转化潜力
- 口腔健康:含CST2的仿生牙膏预防龋齿(临床前验证);
- 抗癌策略:重组CST2抑制肿瘤转移相关蛋白酶(如uPA)。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测唾液CST2(健康成人约0.5-2 μg/mL,龋齿患者降低50%);
- 活性测定:荧光底物(如Z-FR-AMC)评估Cathepsin抑制效率。
(2)分子分析
- 免疫组化:定位CST2在唾液腺导管或肿瘤组织的表达;
- 基因测序:CST2 多态性(如rs1136771)与口腔疾病风险关联。
4. 临床应用
(1)诊断与分型
- 口腔疾病:唾液CST2/Cathepsin B比值预测龋齿进展风险;
- 干燥综合征:抗CST2抗体辅助诊断(特异性>80%)。
(2)治疗进展
-
生物制剂:
- CST2凝胶:治疗口腔溃疡(II期试验);
- 蛋白酶抑制剂鸡尾酒:含CST2靶向肿瘤微环境(临床前)。
- 基因治疗:AAV-CST2递送修复唾液腺功能(动物模型)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 递送效率:唾液冲刷效应影响局部CST2制剂滞留时间;
- 双重角色:需明确CST2在肿瘤中的促/抑癌机制差异。
(2)未来方向
- 纳米载体:壳聚糖-CST2缓释系统增强口腔黏膜吸附;
- 多组学整合:结合CST2变异与口腔微生物组预测个体化风险。
生物活性
Measured by its ability to inhibit active Cathepsin L cleavage of a fluorogenic peptide substrate Z-LR-AMC. The IC50 value is<8.0 nM, as measured underthe described conditions.
Swiss Prot:
P09228
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Trp21-Ala141
实际分子量:
16 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Cystatin SA/CST2 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Trp21-Ala141) of Human Human Cystatin SA/CST2 (Accession P09228) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。