研究方向
Porcine Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor (GM-CSF) 是一种关键的细胞因子,在猪的免疫调节、造血功能和炎症反应中发挥重要作用。以下是关于猪GM-CSF的详细解析,结合最新研究进展(截至2025年4月):
1. 基本特性与功能
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基因与结构
- 基因定位:猪GM-CSF基因位于基因组特定区域(具体位置因品种差异可能不同),编码约144个氨基酸的糖蛋白。
- 结构特征:与人类GM-CSF(约67%同源性)相似,含4个α螺旋和保守的二硫键,通过结合特定受体(如CD116)激活下游信号通路。
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生物学作用
- 免疫调节:促进树突细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的增殖与活化,增强病原体清除能力。
- 造血支持:刺激骨髓祖细胞分化为粒细胞和单核细胞。
- 炎症调控:在感染或疫苗应答中上调,但过度表达可能导致炎症损伤。
2. 应用领域
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疫苗佐剂
- 重组猪GM-CSF(如大肠杆菌或CHO细胞表达系统)可作为疫苗佐剂,显著增强猪圆环病毒(PCV2)、非洲猪瘟(ASFV)等疫苗的免疫效果(2024年研究显示抗体滴度提升30-50%)。
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疾病治疗
- 用于治疗猪呼吸道疾病综合征(PRDC)或细菌性败血症,通过提升白细胞数量改善预后。
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生物技术工具
- 在体外培养中用于扩增猪骨髓细胞或生成抗原提呈细胞(如用于异种移植研究)。
3. 最新研究进展(2025年)
- 基因编辑猪模型:CRISPR-Cas9敲除GM-CSF基因的猪显示免疫缺陷表型,验证其在抗感染中的必要性。
- 纳米载体递送:聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)纳米颗粒包裹GM-CSF mRNA,用于靶向肺部免疫激活(2025年1月《Veterinary Research》报道)。
4. 生产应用
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重组表达系统
- 常用表达宿主:大肠杆菌(成本低,但需复性)、昆虫细胞(糖基化修饰更接近天然)。
- 纯度要求:>90%(用于治疗需符合兽药GMP标准)。
5. 注意事项
- 种属特异性:猪GM-CSF对人类细胞活性较低,但可能与其他家畜(如牛)存在交叉反应。
- 副作用:高剂量可能导致发热或组织炎症,需严格剂量控制。
生物活性
Measured in a cell proliferation assay using TF‑1 human erythroleukemic cells. The ED50 forthis effect is typically 0.6-3.8 ng/mL.
Swiss Prot:
Q29118
种属:
Porcine
表达宿主:
293F
表达区间:
Ala18-Lys144
实际分子量:
15 kDa
标签:
C-His
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Porcine Porcine GM-CSF Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ala18-Lys144) of Porcine Porcine GM-CSF (Accession Q29118) fused with a C-His.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。