研究方向
Trypsin 2/PRSS2 是由 PRSS2 基因编码的 丝氨酸蛋白酶,属于胰蛋白酶家族,主要在胰腺腺泡细胞中合成并以酶原形式(胰蛋白酶原2)分泌至肠道。其核心特征包括:
- 结构特征:含保守的催化三联体(His57, Asp102, Ser195),通过N端肽段切除激活;
-
功能核心:
- 蛋白消化:切割精氨酸/赖氨酸羧基端肽键,激活其他消化酶原(如胰蛋白酶原、胰蛋白酶原);
- 疾病关联:PRSS2突变或异常激活导致胰腺炎,其表达失调与肿瘤进展相关。
1. 生物学功能
(1)消化与酶原激活
- 级联反应启动:激活胰蛋白酶原、胰蛋白酶原和磷脂酶原,驱动食物蛋白消化;
- 自限性调控:胰腺分泌胰蛋白酶抑制剂(SPINK1)防止自身消化。
(2)炎症与组织损伤
- 胰腺炎触发:PRSS2过早激活导致胰腺自消化(如酒精性胰腺炎);
- 炎症信号放大:通过蛋白酶激活受体(PAR2)促进IL-6和TNF-α释放。
(3)肿瘤微环境调控
- 促转移作用:PRSS2通过激活uPA-MMP通路促进ECM降解(结肠癌模型);
- 免疫逃逸:切割PD-L1产生可溶性片段,抑制T细胞功能。
2. 研究意义
(1)理论突破
- 揭示 “胰蛋白酶-PAR2”轴 在慢性胰腺炎纤维化中的核心作用;
- 解析 PRSS2基因变异(如p.G191R)导致遗传性胰腺炎的分子机制。
(2)转化潜力
- 胰腺炎治疗:小分子抑制剂(如Camostat)阻断PRSS2活性;
- 肿瘤靶向:抗PRSS2抗体偶联药物(ADC)靶向肿瘤微环境。
3. 检测方法
(1)蛋白水平
- ELISA:检测血清PRSS2(急性胰腺炎时>50 ng/mL);
- 活性测定:荧光底物(如Boc-Gln-Ala-Arg-AMC)评估酶活性。
(2)基因分析
- 突变筛查:PRSS2 测序(如p.N29I和p.G191R常见于遗传性胰腺炎);
- 免疫组化:定位PRSS2在胰腺或肿瘤组织的异常表达。
4. 临床应用
(1)诊断与分型
- 胰腺炎分型:PRSS2/SPINK1比值鉴别遗传性与特发性胰腺炎;
- 肿瘤预后:PRSS2高表达的胃癌患者转移风险增加。
(2)治疗进展
-
靶向药物:
- Camostat mesylate:抑制PRSS2活性(日本获批用于慢性胰腺炎);
- 单克隆抗体:如PRSS2-neutralizing Ab(临床前阶段)。
- 基因治疗:CRISPR-Cas9编辑 PRSS2 突变(动物模型验证)。
5. 总结与展望
(1)挑战
- 治疗特异性:全身抑制PRSS2可能干扰正常消化功能;
- 动态监测:需开发实时检测胰腺局部PRSS2活性的技术。
(2)未来方向
- 组织靶向递送:纳米载体特异性抑制胰腺或肿瘤PRSS2;
- 多组学整合:结合PRSS2变异与蛋白酶组数据预测疾病风险。
生物活性
Measured by its ability to cleave the fluorogenic peptide substrate, McaRPKPVE-NvalWRK(Dnp)- NH2. The specific activity is >8,000 pmol/min/µg, as measured underthe described conditions.
Swiss Prot:
P07478
种属:
Human
表达宿主:
293F
表达区间:
Ala16-Ser247
实际分子量:
34 kDa
标签:
C- 10*His tag
纯度:
>95% by SDS-PAGE.
内毒素:
<0.1EU/ug of the protein by LAL method.
制剂:
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.
描述:
Recombinant Human Human Trypsin 2/PRSS2 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ala16-Ser247) of Human Human Trypsin 2/PRSS2 (Accession P07478) fused with a C- 10*His tag.
储存:
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of
receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月;
复溶之后,蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月,在2-8℃可保存1周。
复溶:
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底,如果粉末浮起,开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL(请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL),室温平衡5-10 min保证充分溶解,复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存,建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂(如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖),同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装,储存于-20°C至-80°C,随取随用,避免反复冻融。