活性重组蛋白 Recombinant Mouse Thrombopoietin / MK-CSF / ML Protein

研究方向    

1. 基本概述

• 定义：小鼠血小板生成素（Thrombopoietin, TPO）是调控巨核细胞分化与血小板生成的核心细胞因子，结构与功能高度保守（与人类TPO同源性达72%）。
• 基因定位：Thpo 基因位于小鼠16号染色体（与人类THPO 同源），含6个外显子。
• 表达调控：
  • 主要分泌器官：肝细胞（稳态下占80%）、骨髓基质细胞。
  • 反馈机制：血小板通过Mpl受体介导TPO清除，维持动态平衡。

2. 结构与功能特性

(1) 蛋白结构

• 功能域：
  • N端受体结合域（1-154 aa）：含4个保守半胱氨酸（Cys7/28/39/85），形成二硫键稳定构象。
  • C端糖基化域（155-332 aa）：影响血清半衰期（小鼠TPO半衰期约3小时）。
• 翻译后修饰：N-糖基化（Asn110/114）调控分泌效率。

(2) 信号通路

• 经典通路：
  • TPO-Mpl→激活JAK2/STAT5→促进巨核细胞增殖与血小板释放。
  • 协同IL-3/G-CSF增强造血干细胞自我更新。
• 非经典作用：通过PI3K/AKT抑制巨核细胞凋亡。

3. 疾病模型与治疗研究

(1) 血液疾病模型

• 血小板减少症：
  • Thpo-/- 小鼠：血小板计数降低50%，但巨核细胞数量正常（提示TPO主要调控血小板成熟）。
  • 治疗应用：重组小鼠TPO（rmTPO）可加速辐射后血小板恢复（临床前研究）。
• 骨髓纤维化：
  • 转基因TPO过表达小鼠（Alb-TPO）发展为骨髓纤维化（模拟原发性血小板增多症）。

(2) 肿瘤研究

• 化疗保护：TPO预处理减轻卡铂诱导的小鼠血小板减少（减少出血风险）。
• 免疫治疗增效：TPO增强CAR-T细胞在骨髓中的存活（2024年《Blood》研究）。

4. 研究工具与资源

• 基因数据库：Thpo 基因 ID：21826（NCBI Gene）。
• 抗体与试剂：
  • 抗小鼠TPO抗体（克隆AF-488-NA，R&D Systems #AF-488-NA）。
  • 重组小鼠TPO蛋白（PeproTech #315-14）。
• 动物模型：
  • Thpo-/- 小鼠（JAX #003055）：基础血小板研究。
  • Mpl-/- 小鼠（TPO信号完全缺失，JAX #005051）。

生物活性

Measured in a cell proliferation assay using MO7e human megakaryocytic leukemic cells. The ED50 for this effect is 0.4-2.4 ng/mL.

Swiss Prot:
P40226-1


种属:
Mouse


表达宿主:
293F


表达区间:
Ser22-Thr356


实际分子量:
60-75
kDa


标签:
N-His


纯度：
>97% by SDS-PAGE.


内毒素：
＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.


制剂：
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.


描述：
Recombinant Mouse Mouse Thrombopoietin Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ser22-Thr356) of Mouse Mouse Thrombopoietin (Accession P40226-1) fused with a N-His.


储存：
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。


复溶：
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。