活性重组蛋白 Recombinant Mouse CD40 Ligand/TNFSF5 / T-BAM / CD154 Protein

研究方向    

CD40L（基因位于 小鼠X染色体）是TNF超家族（TNFSF）关键成员。作为CD40的配体，主要表达于活化的T细胞、血小板及部分先天免疫细胞，通过双向信号调控体液免疫、血栓形成及炎症反应，在疫苗应答、自身免疫病和动脉粥样硬化中具有核心作用。其短暂性表达和严格调控的特性使其成为免疫治疗的潜在靶点。

1. 分子特性与功能机制

（1）结构与动态调控

• 三聚体构象：
  • 膜结合型为32 kDa II型跨膜蛋白，可被金属蛋白酶（如ADAM10）切割生成可溶型（sCD40L）；
  • 结合CD40的KD≈10-8 M，触发受体簇集（信号持续时间＜24小时）。
• 多细胞作用：
  • 免疫细胞：促进B细胞抗体类别转换（IgG↑5倍）、DC成熟（CD80/86表达↑3倍）；
  • 血小板：激活GPIIb/IIIa介导血栓形成（动脉栓塞风险↑2倍）。

（2）疾病模型关联

• 免疫缺陷：
  • Cd40lg-/- 小鼠生发中心缺失（疫苗接种抗体滴度↓90%）；
• 自身免疫病：
  • SLE模型中sCD40L水平与肾小球肾炎严重度正相关（r=0.65）；
• 心血管疾病：
  • 动脉粥样硬化斑块中CD40L-CD40轴促进巨噬细胞炎症因子分泌（IL-6↑4倍）。

2. 研究工具与干预策略

（1）基因工程模型

• 条件性表达：
  • Cd4-Cre;Cd40lgfl/fl 研究T细胞特异性功能；
• 人源化小鼠：
  • 携带人类CD40LG 突变（如X连锁高IgM综合征相关突变）的模型。

（2）治疗应用

• 激动剂策略：
  • 重组CD40L蛋白增强肿瘤疫苗效力（黑色素瘤模型T细胞浸润↑3倍）；
• 阻断疗法：
  • 抗CD40L单抗（如MR1）减轻移植排斥反应（临床前研究）。

3. 检测与挑战

• 流式检测：
  • CD40L-PE/CD4-FITC双标分析活化T细胞；
• 功能实验：
  • B细胞-OT-II T细胞共育系统评估抗体产生。

挑战与展望

1. 毒性控制：开发短半衰期CD40L变体（如PEG化修饰）；
2. 组织靶向：纳米载体递送siRNA抑制病变部位（如动脉斑块）CD40L过表达；
3. 动态监测：基因编码荧光报告系统实时追踪CD40L表达。

生物活性

Measured in a cell proliferation assay using mouse splenic B cells in the presence of IL-4. The ED50 for this effect is 0.07- 0.35 ng/mL in the presence of a cross‑linking antibody, Mouse AntiHemagglutinin/HA Peptide Monoclonal Antibody.

Swiss Prot:
P27548


种属:
Mouse


表达宿主:
293F


表达区间:
Gly115-Leu260


实际分子量:
22-25
kDa


标签:
C-His


纯度：
>95% by SDS-PAGE.


内毒素：
＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.


制剂：
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.


描述：
Recombinant Mouse Mouse CD40
Ligand/TNFSF5 Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Gly115-Leu260) of Mouse Mouse CD40
Ligand/TNFSF5 (Accession P27548) fused with a C-His.


储存：
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。


复溶：
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。