活性重组蛋白 Recombinant Mouse Wnt3a / MGC119419 / Wnt-3a Protein

研究方向    

Wnt3a（基因位于 小鼠11号染色体）是Wnt/β-catenin信号通路的核心配体。作为分泌型糖蛋白，通过调控胚胎发育、干细胞自我更新及组织再生，在神经发生、骨骼稳态和癌症进展中发挥关键作用。其表达异常可导致发育缺陷或肿瘤发生，是发育生物学与再生医学研究的重要靶点。

1. 分子特性与功能机制

（1）结构与分泌调控

• 翻译后修饰：
  • 棕榈酰化（由Porcn介导）对分泌和活性至关重要，缺失导致胞内滞留；
  • 糖基化修饰（如N-连接糖基化）影响受体结合亲和力（KD≈10-9 M）。
• 信号级联：
  • 结合Frizzled/LRP5/6受体复合物，抑制β-catenin磷酸化降解，促进核转位激活TCF/LEF转录因子；
  • 非经典通路（如Wnt/Ca2+）调控细胞极性（如原肠胚运动）。

（2）疾病模型关联

• 发育缺陷：
  • Wnt3a-/- 小鼠胚胎致死（原条形成失败）；
• 神经退行性疾病：
  • 阿尔茨海默病模型中，Wnt3a过表达减少Aβ斑块（通过激活小胶质细胞吞噬）；
• 癌症进展：
  • 结直肠癌类器官中Wnt3a驱动β-catenin核转位（靶基因Cyclin D1表达↑5倍）。

2. 研究工具与干预策略

（1）实验模型

• 条件性敲除：
  • Nestin-Cre;Wnt3afl/fl 研究神经干细胞维持；
• 重组蛋白应用：
  • 活性Wnt3a蛋白（LDN实验室）维持胚胎干细胞未分化状态（浓度≥100 ng/mL）。

（2）治疗潜力

• 组织再生：
  • 水凝胶缓释Wnt3a促进皮肤创伤修复（临床前模型愈合速度↑40%）；
• 靶向抑制：
  • LGK974（Porcn抑制剂）阻断Wnt3a分泌治疗Wnt依赖性肿瘤。

3. 检测方法与挑战

• 活性检测：
  • TOPFlash荧光素酶报告基因定量β-catenin信号强度；
• 成像技术：
  • 全内反射荧光显微镜（TIRFM）观察Wnt3a囊泡分泌动态。

挑战与展望

1. 递送精准性：开发组织特异性Wnt3a激活系统（如光控释放纳米颗粒）；
2. 剂量调控：解析低浓度（促再生）与高浓度（促癌）效应的分子阈值；
3. 跨物种应用：人源化Wnt3a小鼠模型验证治疗安全性。

生物活性

Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The ED50 forthis effect is <500 ng/mL.

Swiss Prot:
P27467


种属:
Mouse


表达宿主:
293F


表达区间:
Ser19-Lys352


实际分子量:
65-70
kDa


标签:
C-hFc&His tag


纯度：
>95% by SDS-PAGE.


内毒素：
＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.


制剂：
Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.


描述：
Recombinant Mouse Mouse Wnt3a Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Ser19-Lys352) of Mouse Mouse Wnt3a (Accession P27467) fused with a C-hFc&His tag.


储存：
Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.
未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。


复溶：
Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.
收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。