活性重组蛋白 Recombinant Mouse Cathepsin B / Ctsb / Cathepsin B1 Protein

研究方向    

Cathepsin B (Ctsb) 是由 Ctsb 基因编码的 溶酶体半胱氨酸蛋白酶，属于木瓜蛋白酶家族，广泛表达于溶酶体和分泌途径中。其核心特征包括：

• 结构特征：含前体肽（抑制活性）和成熟酶域，兼具内肽酶和外肽酶（羧肽酶）双重活性，最适pH 4.5-6.0；
• 功能核心：
  • 蛋白降解与加工：参与抗原呈递、激素激活及ECM重塑；
  • 炎症与凋亡调控：通过剪切Bid蛋白激活caspase通路；
  • 疾病关联：与肿瘤转移、神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）及炎症性疾病（如关节炎）密切相关。

1. 生物学功能

（1）蛋白水解与细胞稳态

• 溶酶体降解：分解内吞的蛋白质和受损细胞器（自噬-溶酶体途径）；
• ECM重塑：切割胶原IV、层粘连蛋白促进细胞迁移（伤口愈合/肿瘤转移）。

（2）免疫与炎症调控

• 抗原呈递：生成MHC-II类分子结合的抗原肽段；
• 炎症小体激活：通过NLRP3-IL-1β轴加剧炎症反应（如痛风模型）。

（3）肿瘤微环境作用

• 转移促进：
  • 激活MMP前体（如pro-MMP-9）增强ECM降解；
  • 诱导EMT（上皮-间质转化）和血管生成（VEGF释放）。

2. 研究意义

（1）理论突破

• 揭示 “Ctsb-自噬-凋亡”三角关系 在疾病中的动态平衡；
• 解析 Ctsb分泌机制（如外泌体包裹）在肿瘤转移中的作用。

（2）转化潜力

• 抗癌策略：Ctsb抑制剂（如CA-074）阻断转移灶形成；
• 神经保护：靶向Ctsb的siRNA减轻Aβ毒性（AD模型）。

3. 检测方法

（1）活性分析

• 荧光底物：Z-Arg-Arg-AMC检测酶活性（Ex380/Em460 nm）；
• 活性位点标记：DCG-04探针共价结合Ctsb（不可逆抑制剂）。

（2）表达定位

• 免疫组化：区分溶酶体（点状）与分泌型（弥散）Ctsb；
• 基因编辑模型：Ctsb 敲除鼠研究组织特异性表型。

4. 临床应用

（1）诊断潜力

• 肿瘤侵袭性：组织Ctsb活性与乳腺癌淋巴结转移正相关；
• 神经疾病：脑脊液Ctsb水平预测AD进展速率。

（2）治疗进展

• 靶向药物：
  • VBY-036：Ctsb/组织蛋白酶L双抑制剂（II期临床试验）；
  • 纳米载体：pH敏感型Ctsb抑制剂靶向肿瘤微环境。
• 基因治疗：AAV介导的Ctsb shRNA治疗神经退行性疾病（临床前）。

5. 总结与展望

（1）挑战

• 组织特异性：全身抑制可能干扰溶酶体正常功能；
• 动态监测：需开发活体成像技术追踪Ctsb时空活性。

（2）未来方向

• 双靶点设计：Ctsb/MMP联合抑制剂抗转移；
• 多组学整合：结合Ctsb剪切谱与蛋白质组学解析疾病机制。

生物活性

Measured by its ability to cleave the fluorogenic peptide substrate Z-LR-AMC. The specific activity is >2,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.

Swiss Prot:

P10605

种属:

Mouse

表达宿主:

293F

表达区间:

His18-Phe339

实际分子量:

43 kDa

标签:

C- 10*His tag

纯度：

>95% by SDS-PAGE.

内毒素：

＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.

制剂：

Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.

描述：

Recombinant Mouse Mouse Cathepsin B Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (His18-Phe339) of Mouse Mouse Cathepsin B (Accession P10605) fused with a C- 10*His tag.

储存：

Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.

未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。

复溶：

Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.

收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。