活性重组蛋白 Recombinant Human Alkaline / IAP / ALPI / Alkaline Phosphatase Protein

研究方向    

Alkaline Phosphatase (ALP) 是一类广泛分布于人体组织的 金属酶，属于水解酶家族，在碱性环境（pH 9-10）下催化磷酸单酯的水解反应。

1. 生物学功能

（1）骨代谢与矿化

• 成骨细胞活性标志：ALPL水解焦磷酸盐（PPi），促进羟基磷灰石沉积（缺陷导致低磷酸酯酶症，HPP）；
• 维生素B6代谢：ALPL催化磷酸吡哆醛（PLP）水解为活性维生素B6形式。

（2）肠道与肝脏功能

• 脂质吸收：肠道ALPI通过去磷酸化脂蛋白促进脂肪酸吸收；
• 解毒作用：肝脏ALP参与胆红素代谢，胆汁淤积时血清ALP显著升高。

（3）疾病关联

• 肿瘤标志物：胎盘型ALP（ALPP）在精原细胞瘤和卵巢癌中重现性表达；
• 炎症响应：内毒素通过TLR4上调ALP表达，可能参与抗炎保护。

2. 研究意义

（1）理论突破

• 揭示 ALPL基因突变谱：300余种突变导致HPP表型差异（如围产期致死型vs.成人迟发型）；
• 解析 ALP多效性：同一酶在骨、肝、肠中的差异化调控机制。

（2）转化潜力

• 酶替代疗法：重组ALP（Asfotase alfa）治疗HPP获FDA批准；
• 抗癌靶点：抗ALPP抗体偶联药物（ADC）用于生殖细胞肿瘤临床试验。

3. 检测方法

（1）酶活性检测

• 比色法：对硝基苯磷酸酯（pNPP）为底物，检测405 nm吸光度（血清正常范围40-130 U/L）；
• 同工酶区分：电泳或热灭活法（胎盘ALP耐热，骨ALP敏感）。

（2）基因与分子分析

• 基因测序：ALPL 全外显子筛查诊断HPP；
• 免疫组化：定位ALPP在肿瘤组织的表达（如精原细胞瘤诊断）。

4. 临床应用

（1）诊断与监测

• 肝胆疾病：血清ALP升高（>3倍上限）提示胆道梗阻或浸润性肝病；
• 骨代谢异常：ALP联合骨钙素（OC）评估Paget病或骨转移癌。

（2）治疗进展

• HPP治疗：Asfotase alfa（Strensiq）每周皮下注射改善骨矿化；
• 靶向药物：ALPP-CAR-T疗法用于复发/难治性生殖细胞肿瘤（临床前阶段）。

5. 总结与展望

（1）挑战

• 特异性不足：血清ALP升高需结合影像学/同工酶分析明确病因；
• 治疗成本：酶替代疗法年费用超50万美元，限制普及。

（2）未来方向

• 基因编辑：CRISPR修复 ALPL 突变（HPP动物模型验证）；
• 多模态检测：微流控芯片整合ALP活性与同工酶分型。

生物活性

Measured by its ability to cleave a fluorogenic substrate, 4- Methylumbelliferyl phosphate (4- MUP). The specific activity is >30,000 pmol/min/µg, as measured under the described conditions.

Swiss Prot:

P05186

种属:

Human

表达宿主:

293F

表达区间:

Leu18-Ser502

实际分子量:

65- 75 kDa

标签:

C-His

纯度：

>95% by SDS-PAGE.

内毒素：

＜0.1EU/ug of the protein by LAL method.

制剂：

Lyophilized from a 0.22 μm filtered solution of PBS, pH 7.4.Contact us for customized product form or formulation.

描述：

Recombinant Human Human Alkaline Phosphatase/ALPL Protein is produced by 293F expression system. The target protein is expressed with sequence (Leu18-Ser502) of Human Human Alkaline Phosphatase/ALPL (Accession P05186) fused with a C-His.

储存：

Store at -20℃.Store the lyophilized protein at -20℃ to -80 ℃ up to 1 year from the date of receipt.
After reconstitution, the protein solution is stable at -20℃ for 3 months, at 2-8℃ for up to 1 week.

未开盖的干粉蛋白在 -20°C至-80°C可保存12个月；
复溶之后，蛋白溶液在-20°C及以下可保存3个月，在2-8℃可保存1周。

复溶：

Centrifuge the vial before opening. Reconstitute to a concentration of 0.1-0.5 mg/mL in sterile distilled water. Avoid vortex or vigorously pipetting the protein. For long term storage, it is recommended to add a carrier protein or stablizer (e.g. 0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS or 5% Trehalose), and aliquot the reconstituted protein solution to minimize free-thaw cycles.

收到重组蛋白产品之后请检查蛋白冻干粉末是否贴于瓶底，如果粉末浮起，开盖之前请先低温离心。将蛋白用说明书中指定的缓冲液复溶至0.1-0.5 mg/mL（请注意蛋白复溶浓度不能低于0.1 mg/mL），室温平衡5-10 min保证充分溶解，复溶过程中请不要剧烈涡旋及吹打蛋白溶液。如需长期储存，建议复溶时添加载体蛋白或者稳定剂（如0.1% BSA, 5% HSA, 10% FBS 或者 5% 海藻糖），同时将复溶后的蛋白溶液按照需求进行分装，储存于-20°C至-80°C，随取随用，避免反复冻融。